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手足口病患者样本特异性核酸检测分析

时间:2020-02-13 11:23作者:仲惟惟 尹晔
本文导读:这是一篇关于手足口病患者样本特异性核酸检测分析的文章,手足口病是由多种人肠道病毒引起的一种儿童常见传染病,大多数患者症状轻微,以发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹为主要症状。

  摘    要: 目的 比较手足口病患者咽拭、粪便样本中肠道病毒(EV)的检出率,为手足口病监测样本采集的选择提供依据。方法 采集2013年间鞍山地区医疗机构临床诊断手足口病患者63例咽拭、粪便配对标本。采用Real-time PCR法进行柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)、肠道病毒71型(EV 71)、其他肠道病毒型检测。结果 63例患者配对样本中,Cox A16、EV 71、肠道病毒通用型咽拭子阳性率分别为26.98%、1.59%和26.98%,粪便阳性率分别为22.22%、1.59%和31.75%。结果显示两种样本病毒核酸阳性率,差异无统计学意义(χ2=0.534,P>0.05)。两种样本检测结果相关性,差异有统计学意义(χ2=8.036,P<0.05)。咽拭样本和粪便配对样本核酸检测阳性率,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 咽拭样本和粪便样本核酸检测阳性率相同,可以采集咽拭样本代替粪便标本。

  关键词: 手足口病; 病原学; 肠道病毒;

  Abstract: Objective To compare the detection rate of enterovirus(EV)in swallow swab and fecal samples of patients with hand-foot-mouth disease, and to provide evidence for the monitoring sample selection of hand-foot-mouth disease. Method In 2013, 63 patients with hand-foot-mouth disease clinically diagnosed by medical institutions in Anshan district were collected and paired samples of pharyngeal swabs and feces were collected.Cox A16, EV 71 and other enter virus types were detected by real-time PCR. Results Among the 63 pairs of specimens, the positive rates of Cox A16,EV 71 and other Etiology in throat swabs were 26.98%, 1.59% and 31.75% respectively, and in excrements were 22.22%, 1.59% and 31.75%respectively. The results showed that the positive rate of viral nucleic acid in the two samples was not statistically significant(χ2=0.534,P>0.05). The correlation between the two samples was statistically significant(χ2=8.036,P<0.05). There was no significant difference in the positive rate of nucleic acid detection between the throat swab and the fecal paired sample(P>0.05). Conclusion The positive rate of nucleic acid detection in throat swab and fecal samples is the same, and throat swab samples can be taken instead of fecal specimens.

  Keyword: Hand-foot-mouth disease; Etiology; Enterovirus;

  手足口病是由多种人肠道病毒引起的一种儿童常见传染病,大多数患者症状轻微,以发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹为主要症状。少数患者可出现无菌性脑膜炎、脑炎、急性弛缓性麻痹、神经源性肺水肿和心肌炎等,个别重症患儿病情进展快,可导致死亡。本文通过Real-time PCR法对2013年鞍山地区63例手足口病患者的咽拭和粪便样本进行特异性核酸检测分析,为手足口病聚集性疫情、暴发疫情和常规监测样本采集提供科学依据,现报告如下。

  1 、材料与方法

  1.1 、样本来源

  采集2013年鞍山地区医疗机构临床诊断为手足口病患者发病7天内的样本,采集后4℃保存,送鞍山市疾控检测,如果当天不能检测,送-70℃保存待检。共收集63例患者的咽拭子和粪便标本。年龄4~6岁,男28例,女35例。

  1.2、 试剂与仪器

  采用上海普洛麦格生物产品有限公司的promega EV 71、Cox A16、肠道通用病毒检测试剂盒,使用BIO-RAD IQ5 Real-time PCR PCR检测仪器。

  1.3 、检测方法

  依据《手足口病预防控制指南》及试剂盒说明书,应用Real-time PCR法对柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)、肠道病毒71型(EV 71)、其他肠道病毒进行检测。
 

手足口病患者样本特异性核酸检测分析
 

  1.4 、统计学处理

  采用SPSS 16.0软件进行统计分析,经χ2检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。

  2、 结果

  2.1、 两种样本检出率

  63例患者样本中,Cox A16、EV 71、肠道病毒通用型咽拭子阳性率分别为26.98%(17/63)、1.59%(1/63)和26.98%(17/63),粪便阳性率分别为22.22%(14/63)、1.59%(1/63)和31.75%(20/63)。咽拭和粪便样本病毒核酸阳性检出率,差异无统计学意义(χ2=0.534,P>0.05)。

  2.2、 两种样本配对比较

  两种样本核酸检测阳性率之间存在关联,差异有统计学意义(χ2=8.036,P<0.05)。两种样本核酸检测结果McNemar检验,差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

  表1 两种样本病毒核酸检测配对比较情况(例)
表1 两种样本病毒核酸检测配对比较情况(例)

  3、 讨论

  自2008年手足口病列入法定传染病以来,在我国多地手足口病都有暴发流行[1,2,3]。针对聚集或者暴发疫情,及时采集检测样本为核实疫情提供有力依据。本次研究结果显示,两种样本核酸检测阳性率之间存在关联,差异有统计学意义(P<0.05)。即粪便样本核酸检测是阳性,咽拭样本核酸检测也是阳性。两种样本核酸检测结果,差异无统计学意义(P>0.05)。这表明,粪便样本和咽拭样本在用Real-time PCR法进行特异性核酸检测分析时,阳性率接近。在发生聚集或爆发疫情时,为防止粪便样本不能及时上送,可以采集咽拭样本进行核酸检测,以及时核实疫情。

  本次样本收集依靠住院临床医生和疾控机构,不同采集者采集样本存在差异。偏远地区患者样本当天不能检测,监测结果存在差异。仅收集1年样本进行分析,建议长期监测分析。

  参考文献

  [1] 罗平编.饮料资料、饮料分析与检验[M].北京:中国轻工业出版社,1992:311-313.
  [2] 邰昌松,肖慧贤.用气相色谱-质谱联用技术分析钩吻碱中毒[J].中国卫生检验杂志,1999,9(1):20.
  [3]Liu J,Wangs,Liu H,et al. The monitoring biomarker for immune of lymphocytes in the eidedy[J]. Mech Ageing Dev,1997,94(2):178.

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