热门标签:代写本科论文 写作发表 工程师论文 代写一篇论文多少钱
当前位置: 代写一篇论文多少钱 > 医学论文 > 适用于SLE患者的抗中性粒细胞胞浆抗体检测探析

适用于SLE患者的抗中性粒细胞胞浆抗体检测探析

时间:2019-02-09 18:33作者:董晓微 崔学强 张俊华
本文导读:这是一篇关于适用于SLE患者的抗中性粒细胞胞浆抗体检测探析的文章,对于SLE患者, 在常规IIF检测ANCA的基础上, 增加ELISA检测, 所测得的AN-CA阳性准确率较高, ANCA阳性能够从一定程度上反映SLEDAI、SLE疾病活动性, ANCA阳性与SLE疾病诊断之间有一定关联。

  摘要:目的分析中性粒细胞胞浆抗体 (ANCA) 检测应用于系统性红斑狼疮疾病 (SLE) 的诊断价值。方法选取医院2015年9月-2017年9月收治的SLE的患者62例, 通过间接免疫荧光法 (IIF) 检测ANCA含量, 对于阳性ANCA患者再以酶联免疫吸附法 (ELISA) 进行蛋白水解酶3 (PR3) 、抗髓过氧化物酶 (MPO) 含量的测定, 另选取同期接受检查的51例健康群体经ELISA检测PR3、MPO含量的资料, 比较SLE和健康群体ANCA阳性率差异, SLE活动性评估以SLE活动指数 (SLEDAI) 进行, 探讨ANCA与SLEDAI的关系。结果SLE患者ANCA阳性检出率 (37.10%) 显着高于健康人群 (1.96%) (P<0.05) ;ANCA阳性和ANCA阴性皮肤血管炎、肺间质变、补体C3或C4下降、肾功能受损、dsDNA抗体阳性有显着差异 (P<0.05) ;ANCA阳性SLE患者SLEDAI≥10 (73.91%) 显着高于ANCA阴性 (58.97%) , SLEDAI<10 (26.09%) 显着低于ANCA阴性 (41.03%) .结论对于SLE患者, 可采取AN-CA检测, 其具有较为准确的阳性检出率, 同时对SLE疾病活动性的判断有一定诊断意义。
  
  关键词:ANCA; 系统性红斑狼疮;

Application Of Serum ANCA For Systemic Lupus Erythematosus

  
  Abstract:Objective To analyze the diagnostic value of ANCA for systemic lupus erythematosus (SLE) .Methods From September 2015to September 2017, 62patients with SLE were selected in our hospital.The content of ANCAwas detected by indirect immunofluorescence assay (IIF) , and the protein hydrolase 3 (PR3) , anti myeloperoxidase (MPO) was determined by Elisa for the patients with positive ANCA.In addition, 51healthy subjects who were examined in the same period were selected.PR3and MPO content were examined by ELISA.The difference of ANCA positive rate between SLE and healthy subjects was evaluated by SLE activity index (SLEDAI) .The relationship between ANCA and SLEDAI was discussed.Results The ANCA positive rate (37.10%) was significantly higher than that in healthy controls (1.96%) (P<0.05) .There were significant differences in ANCA negative cutaneous vasculitis, pulmonary interstitial degeneration, decreased complement C 3or C 4, and impaired renal function and positive dsDNA (P<0.05) .In SLE patients with positive SLEDAI≥10 (73.91%) was significantly higher than that in patients with negative ANCA (58.97%) and SLEDAI<10 (26.09%) was significantly lower than that in patients with negative ANCA (41.03%) .Conclusion ANCA can be used in the detection of SLE, and it has a more accurate positive detection rate.At the same time, it has a value for the diagnosis of systemic lupus erythematosus.
  
  Keyword:ANCA; systemic lupus erythematosus;
  
  系统性红斑狼疮 (systemic lupus erythematosus, SLE) 临床症状较为复杂, 通常以多系统侵害为主要表现, 尤其是肾脏、皮肤血管炎损伤较为严重, 其发病原因较为复杂。近几年, 全世界对SLE患者的检测方法较为重视, 抗中性粒细胞胞浆抗体 (antineutrophil cytoplasmic antibody, ANCA) 的发现为SLE的检测有推动性影响。ANCA是一种免疫球蛋白, 在系统性血管炎患者中具有较高的阳性检出率, 如类风湿关节炎、溃疡性结肠炎等, 在自身免疫性疾病中较为多见。有研究称, SLE患者ANCA检测阳性检出率较高, 且能够监测SLE疾病活动性[1,2].既往临床上以间接免疫荧光法 (indirect immunofluorescence, IIF) 作为检测ANCA的“金标准”, 具有简便、廉价等优势[3].但IIF具有一定局限性, 例如无法做定量分析, 而酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA) 能够弥补IIF的不足, 考虑可能适用于SLE患者ANCA的检测, 本文对此展开研究, 报道如下。
  
  1、资料与方法
  
  1.1 一般资料
  
  选择62例2015年9月-2017年9月在医院接受治疗的SLE患者, 所有入选者均有完整的IIF检测ANCA资料, 并对阳性ANCA患者进行ELISA检测, 患者年龄43-75岁 (均62.17±3.08) 岁, 男8例, 女54例;另选择同期经ELISA检测ANCA的正常人群51例, 年龄29-78岁 (均58.74±4.15) 岁, 男8例, 女43例, 两种群体人口学资料差异不显着 (P>0.05) .纳入标准[4]: (1) 均达到美国风湿病学会于1997年修订的SLE诊断标准[5]; (2) 患方对检测项目知情, 签订知情同意书; (3) 患者均为成年人; (4) 患者在检测过程中依从性良好。排除标准: (1) 有严重代谢类疾病、重大脏器受损者; (2) 合并精神障碍者; (3) 资料不全者。
  
  1.2 方法
  
  抽取入选者4ml静脉血, 放置于无菌的真空生化试管内, 由专人以3 000r/min离心10min, 获得全部入选者的血清样本。ANCA检测首先以IIF进行, 用PBS缓冲液稀释患者血清, 浓度比为10∶1, 依据试剂盒上的操作说明, 规范操作, 分出阴性、阳性、空白对照结果。再将IIF检测结果为ANCA阳性的入选者进行ELISA蛋白水解酶3 (Proteolytic enzyme 3, PR3) 、抗髓过氧化物酶 (Myeloperoxidase resistance, MPO) 检测, 并通过PR3、MPO含量判断ANCA阳性情况。
  
  1.3 评价指标
  
  比较健康入选者、其他疾病患者和SLE患者阳性ANCA检出率的不同, 并统计AN-CA阳性患者和阴性患者SLE活动指数 (systemic lupus erythematosus diseaseactivity index, SLE-DAI) 方面的差异。本研究SLEDAI观察指标包括贫血、补体、肾功能、dsDNA抗体、皮肤血管炎、发热、肺间质变、关节肿痛、血沉。对SLE患者活动指标情况进行判读, SLEDAI积分低于10分为非活动性, 超过10分为活动性[6].
  
  1.4 统计学方法
  
  使用统计学CHISS 2014版数据处理软件, 计数资料以率 (%) 表示, χ2检验, 计量资料以 () 表示, t检验, P<0.05为差异有统计学意义。
  
  2、结果
  
  2.1 SLE患者、健康人群ANCA阳性检出率的比较
  
  SLE患者和健康人群ANCA阳性检出率有显着差异 (P<0.05) , 见表1.
  
  2.2 SLE患者ANCA检测和SLE活动性指标的关系
  
  SLE患者补体C3或C4下降、肺间质变、皮肤血管炎、肾功能受损、dsDNA抗体阳性方面ANCA阳性显着高于ANCA阴性 (P<0.05) , 而贫血、血沉>20mm/h、发热、关节肿痛ANCA阳性和AN-CA阴性间差异不显着 (P>0.05) , 见表2.

表1 SLE患者、健康人群阳性ANCA检出率的比较
SLE患者、健康人群阳性ANCA检出率的比较

 

表2 SLE患者ANCA检测与SLE活动性指标的关系
SLE患者ANCA检测与SLE活动性指标的关系


  2.3 SLE患者ANCA阳性与SLEDAI的比较
  
  对ANCA阳性SLE患者进行SLEDAI积分评价, ≥10的占比为73.91%, ANCA阴性SLEDAI积分≥10占比为58.97%, 有显着差异 (P<0.05) , 差异显着 (P<0.05) , 见表3.

表3 SLE患者ANCA阳性与SLEDAI的比较
SLE患者ANCA阳性与SLEDAI的比较

  
  3、讨论
  
  SLE为一类典型的自身免疫性疾病, 其病理学机制可能是受到可溶性抗原-抗体免疫复合物在血管壁上积聚, 或者是自身抗体受到免疫介导, 高度活化了机体内的B淋巴细胞、T淋巴细胞等, 形成免疫复合物, 使病变延伸到机体多个脏器或组织, 诱发多系统的免疫学异常, 形成大量具有高亲和力的自身抗体, 针对健康细胞不同成分进行抑制, 诱发本病[7,8,9].如果本病患者得不到及时、有效的诊断和治疗, 病情会长时间恶化, 预后较差。
  
  ANCA主要存在于单核细胞胞浆或中性粒细胞内, 是一种与胞浆中溶酶体酶发生反应的抗原抗体, 于1990年在系统性血管炎中被发现, 而随着临床研究进展, ANCA逐渐被发现于SLE患者血清中, 作为血清学标记性抗体之一, 但关于ANCA与SLE的具体诊断意义却一直缺乏系统评价[10].同时, 临床上诊断ANCA的方法也多种多样, 比如免疫沉淀法、IIF、ELISA、放射免疫法等, 其中以IIF检测ANCA的临床应用时间较长, 是一种较为经典的ANCA检测方法, 同时也作为ANCA检测的“金标准”, 但其单独使用的缺点是由于受到乙醇固定过程中有核糖体P蛋白、线粒体等物质, 易造成自身抗体和其结合, 形成强弱不等的荧光, 对ANCA结果造成影响[11,12,13].IIF尽管能测定总ANCA情况, 但难以区分靶抗原, 需要添加特异性检测。ELISA因为具有能够定量测量PR3、MPO.PR3、MPO均为ANCA的主要抗原。PR3是一类丝氨酸蛋白酶, 存在于中性粒细胞胞浆嗜天青颗粒内, 具有促进血小板活化, 降解外基质如弹性蛋白、IV型胶原的能力, 是诊断血管炎的重要指标之一。MPO是一类血红素蛋白酶, 主要存在于髓系细胞嗜苯胺蓝颗粒之中, 属血红素过氧化物酶的一种, 为髓细胞特异性标志[14].二者与SLE疾病活动度有显着相关性, 因此ELISA在ANCA的测量中具有良好效果。但出于最优化选择、成本方面的计划, 先进行IIF, 再进行ELISA为目前为止ANCA检测的最佳方式[15].
  
  本研究通过分析ELISA结合IIF对健康人群和SLE患者ANCA阳性检出率的比较, 发现SLE患者阳性检出率明显高于健康人群, 提示ANCA具有可能诊断SLE疾病的意义, 但关于ANCA对SLE的影响机制尚不明确。通过观察ANCA阴性、ANCA阳性患者临床症状和实验室指标等活动性指标方面的差异, 发现ANCA阴性和ANCA阳性患者在血沉>20mm/h、贫血、关节肿痛、发热方面没有显着差异, 而在肾功能受损、皮肤血管炎、肺间质变、补体C3或C4下降、dsDNA抗体阳性方面差异显着, ANCA阳性患者SLEDAI≥10的占比明显高于ANCA阳性患者, 提示SLEDAI、活动性指标和ANCA阳性检出情况之间有一定关系。这考虑是ANCA阳性在SLE患者狼疮病情活动期会产生毛细血管扩张、血管病变加剧等特点, 形成皮肤血管炎, 或者部分患者伴有肺间质变、肾小球肾炎等病情, 累及患者肺、肾等器官组织, 加重病情。ANCA阳性在dsDNA抗体阳性方面有显着差异, 考虑是dsDNA抗体是一种具有双链DNA结构的抗体, 能够和DNA结合, 形成免疫复合物, 沉积于肾小球基底膜, 是SLE活动期的重要指标[16].C3、C4均为补体系统中较为重要的组成部分, 具有激活主要途径的生物学功能, 补体C3或C4下降能够说明SLE病情的发生及发展, 在本研究中, 补体C3或C4下降提示SLE处于活动期。而ANCA阳性对贫血、关节肿痛、血沉>20 mm/h、发热等症状没有显着影响, 考虑ANCA阳性在这些方面敏感性不高, 或者受到样本数量限制的影响, 产生一定偏差。总之, ELISA检测所得的ANCA阳性率可能从一定程度上可以反映SLE病情的严重程度、疾病活动度。
  
  综上所述, 对于SLE患者, 在常规IIF检测ANCA的基础上, 增加ELISA检测, 所测得的AN-CA阳性准确率较高, ANCA阳性能够从一定程度上反映SLEDAI、SLE疾病活动性, ANCA阳性与SLE疾病诊断之间有一定关联。
  
  参考文献

  [1]蔡细英, 梁寅艳。抗中性粒细胞胞浆抗体的检测在诊断系统性红斑狼疮活动期的临床意义[J].现代中西医结合杂志, 2012, 21 (6) :614.
  [2]楼洪萍, 洪理泉。抗中性粒细胞胞浆抗体与抗核抗体联合检测在系统性红斑狼疮中的临床意义[J].中国卫生检验杂志, 2012, 22 (6) :1362.
  [3]王美霞, 王杨威, 吕连杰, 等。儿童ANCA相关性血管炎累及中枢神经系统病变1例[J].中国实验诊断学, 2017, 21 (8) :1466.
  [4]王恝歆, 赵志丹, 钟白云, 等。血清C1q检测在系统性红斑狼疮疾病活动性判断及狼疮肾炎诊断中的价值[J].中国现代医学杂志, 2016, 26 (9) :54.
  [5]石莉萍, 张利方, 秦滢, 等。中性粒细胞胞浆抗体异常在诊断系统性红斑狼疮中的临床价值[J].华南国防医学杂志, 2014, 28 (1) :57.
  [6]杨晓, 姜红。抗中性粒细胞胞浆抗体与小儿系统性红斑狼疮活动性及狼疮性肾炎相关性分析[J].中国实用儿科杂志, 2013 (10) :784.
  [7]黄丽云, 符火, 高飞。系统性红斑狼疮患者特异性抗体与病毒感染的相关性分析[J].中华医院感染学杂志, 2014 (15) :12.
  [8]苏荣, 唐秀英, 席向红, 等。男性儿童与成人系统性红斑狼疮的临床分析[J].中国全科医学, 2016, 19 (9) :1095.
  [9]柏明见, 冯璟, 冯珍如, 等。血清清蛋白测定在系统性红斑狼疮活动性评估中的应用价值[J].现代检验医学杂志, 2015, 30 (6) :116.
  [10]王雪, 刘名, 刘津, 等。妊娠合并系统性红斑狼疮的临床分析[J].中国实验诊断学, 2015 (11) :1939.
  [11]李志, 杨婷婷, 李文哲, 等。系统性红斑狼疮患者外周血Th17与Treg细胞及相关细胞因子表达的研究[J].中国实验诊断学, 2015, 19 (2) :253.
  [12]刘维佳, 黄俊波。ANCA相关性系统性小血管炎患者血清指标、内皮损伤标记物与肾损害的关系[J].海南医学院学报, 2016, 22 (10) :976.
  [13]谢闻悦, 聂李平, 杨媛慧。系统性红斑狼疮患者外周血CXCL13及其受体CXCR5表达水平的研究[J].中国实验诊断学, 2015 (10) :1689.
  [14]张秀琴。抗中性粒细胞胞质抗体, 抗髓过氧化物酶, 抗蛋白酶3在系统性血管炎和其他自身免疫病中的临床意义[J].实用医技杂志, 2017, 24 (5) :478.
  [15]张亚清, 周衡, 张星虎。系统性红斑狼疮伴中枢神经系统损害的诊断及治疗分析[J].中国全科医学, 2015, 18 (27) :3352.
  [16]王许娜, 尹光辉, 孙晓旭, 等。抗核小体抗体与抗dsDNA抗体在系统性红斑狼疮及狼疮肾炎诊断中的意义[J].中国现代医学杂志, 2015, 25 (11) :97.

相关文章
联系我们
  • 写作QQ:78307562
  • 发表QQ:78303642
  • 服务电话:18930620780
  • 售后电话:18930493766
  • 邮箱:lunwen021@163.com
范文范例
网站地图 | 网站介绍 | 联系我们 | 服务承诺| 服务报价| 论文要求 | 期刊发表 | 服务流程